超高效液相色谱-串联质谱法测定乳与乳制品中牛乳铁蛋白

更新时间:2023-05-28

【摘要】建立了超高效液相色谱-串联质谱技术定量检测乳制品中牛乳铁蛋白含量的方法。样品经脱脂、酶解后,利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q/Exactive-HRMS)和Protein Pilot软件分析,实现了乳铁蛋白及其肽段的鉴定;通过初级局部序列搜索工具(basic local alignment search tool, BLAST)与Uniprot数据库对比分析筛选出牛乳铁蛋白的8个特征肽段;选择其中3个响应强度高、稳定性好的特征肽段进一步通过超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UPLC-QqQ-MS)进行验证和多反应监测(MRM)定量研究,并考察了空白基质匹配的外标法和内标法对乳铁蛋白检测结果的差异。采用外标法定量时,3个肽段在各自范围内线性关系良好,检出限为0.023～0.041 mg/kg,定量限为0.077～0.137 mg/kg,平均回收率为93.8%～103.9%,日内精密度≤8.8%,日间精密度≤9.5%。该方法抗干扰能力强,灵敏度高,重复性好,适用于乳及乳制品中牛乳铁蛋白的含量测定。

【关键词】 超高效液相色谱-串联质谱 特征肽段 牛乳铁蛋白 乳及乳制品

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